酶底物法检测水中总大肠菌群大肠埃希氏菌的影
近年来随着国家对环境问题日益重视,越来越多的检测设备和技术应用于水质检测中。水质检测是一项技术性非常强的系统工程,影响检测结果和检测数据的因素较多,只有严格控制相关的影响因素,确保在标准环境下进行采样、检测和分析,才能提高检测结果的准确性。本文对酶底物法检测水中总大肠菌群大肠埃希氏菌的影响因素进行了调研分析,现将有关情况报道如下。
1.资料与方法
1.1 基础资料和流程
选取我县某乡镇水站的入厂水、出厂水、水源水进行样品采集。按照水样采集流程,主要应用的仪器设备或材料有:紫外灯、恒温培养箱、51孔定量盘封口机、51孔定量盘、100毫升灭菌玻璃瓶,51孔定量盘阳性比色盘和大肠菌群检测试剂等。
1.2 观察检测
样品采集及水质检验按照《生活饮用水标准检验方法-水样采集和保存》(GB/T5750.2-2006﹚进行样品采集;检验方法按照《生活饮用水标准检验方法》﹙GB5750.12-2006﹚执行;监测结果评价依据GB5749-2006(生活饮用水卫生标准)及有关规定进行评价。对不同环境(自然环境、无菌环境)、不同温度、不同培养时间逐项进行检测法分析,并对结果进行观察记录。
1.3 统计学处理
采用SPSS16.0专业统计软件对各类数据进行分析处理,同时引入t检验、χ2检验,以P<0.05作为差异标准,具有统计学意义。
2.结果
2.1 不同环境对水中总大肠菌群、大肠埃希氏菌检测结果的影响分析(如表1所示,单位:MPN?100mL-1)
项目 |
不同环境对检测结果的影响分析 |
总大肠菌群 |
大肠埃希氏菌 |
无菌环境 |
自然环境 |
无菌环境 |
自然环境 |
样品1 |
11.1 |
12.4 |
7.5 |
8.5 |
样品2 |
13.7 |
15 |
8.7 |
8.7 |
样品3 |
20.7 |
22.2 |
16.4 |
2 |
样品4 |
5.3 |
6.4 |
3.1 |
3.1 |
样品5 |
1 |
1 |
1 |
1 |
样品6 |
144.5 |
165.2 |
88.5 |
94.5 |
样品7 |
200.5 |
200.5 |
200.5 |
200.5 |
注:上述样本,样1到样4是从该水站不同时间采集到的入厂水样,样5是出厂水样,样6和样7是该站水源水样。
温度/℃ |
培养温度对检测结果的影响统计结果 |
总大肠菌群 |
大肠埃希氏菌 |
样1 |
样2 |
样3 |
样4 |
样5 |
样6 |
样7 |
样1 |
样2 |
样3 |
样4 |
样5 |
样6 |
样7 |
28 |
1 |
2 |
9.9 |
1 |
1 |
73.8 |
94.5 |
1 |
1 |
3.1 |
1 |
1 |
59.1 |
78.2 |
32 |
4.2 |
7.5 |
15 |
4.2 |
1 |
94.5 |
201.3 |
4.2 |
8.7 |
13.7 |
1 |
1 |
78.2 |
94.5 |
35 |
9.9 |
12.4 |
19.2 |
4.2 |
1 |
129.8 |
200.5 |
7.5 |
8.7 |
15 |
3.1 |
1 |
88.5 |
200.5 |
36 |
11.1 |
13.7 |
20.7 |
5.3 |
1 |
144.5 |
200.5 |
7.5 |
8.7 |
16.4 |
3.1 |
1 |
88.5 |
200.5 |
37 |
11.1 |
13.7 |
20.7 |
5.3 |
1 |
129.8 |
200.5 |
7.5 |
8.7 |
16.4 |
3.1 |
1 |
88.5 |
200.5 |
40 |
1 |
1 |
5.3 |
1 |
1 |
88.5 |
129.8 |
1.0 |
1.0 |
5.3 |
1 |
1 |
42.9 |
88.5 |
时间/h |
培养温度对检测结果的影响统计结果 |
总大肠菌群 |
大肠埃希氏菌 |
样1 |
样2 |
样3 |
样4 |
样5 |
样6 |
样7 |
样1 |
样2 |
样3 |
样4 |
样5 |
样6 |
样7 |
16 |
1 |
1 |
3.1 |
1 |
1 |
38.4 |
53.1 |
1 |
1 |
3.1 |
1 |
1 |
35.4 |
37.5 |
18 |
2 |
1 |
5.3 |
1 |
1 |
38.4 |
59.1 |
1 |
1 |
4.2 |
1 |
1 |
36.4 |
40.6 |
20 |
4.2 |
2 |
7.5 |
2 |
1 |
45.3 |
73.8 |
1 |
1 |
4.2 |
3.1 |
1 |
36.4 |
40.6 |
22 |
12.4 |
12.4 |
19.2 |
5.3 |
1 |
144.5 |
200.5 |
1 |
1 |
4.2 |
3.1 |
1 |
38.4 |
42.9 |
24 |
11.1 |
13.7 |
20.7 |
5.3 |
1 |
144.5 |
200.5 |
7.5 |
8.7 |
16.4 |
3.1 |
1 |
88.5 |
200.5 |
28 |
12.4 |
12.4 |
20.7 |
5.3 |
1 |
144.5 |
200.5 |
7.5 |
8.7 |
16.4 |
3.1 |
1 |
88.5 |
200.5 |
32 |
17.8 |
19.2 |
30.6 |
12.4 |
|
200.5 |
200.5 |
11.1 |
12.4 |
23.8 |
5.3 |
1 |
165.2 |
200.5 |
根据检测结果可以看出,在无菌环境和自然环境中对总大肠菌群和大肠埃希氏菌的检测值差异不明显,无统计学意义(P>0.05)。
2.2 培养温度对水中总大肠菌群、大肠埃希氏菌检测结果的影响分析(如表2所示,单位:MPN?100mL-1)温度不同,结果存在不同差异,总大肠菌群、大肠埃希氏菌在温度28℃、32℃、40℃下检测结果和温度为36℃的检测结果差异明显,具有统计学意义(P<0.05),35℃、36℃、37℃之间检测结果差异不明显,表明培养温度对总大肠菌群、大肠埃希氏菌影响较大,应当控制在35℃至37℃之间为宜。
2.3 培养时间对水中总大肠菌群、大肠埃希氏菌检测结果的影响分析(如表3所示,单位:MPN?100mL-1)
根据上述统计结果可以看出,培养时间不同,对水中总大肠菌群、大肠埃希氏菌检测结果产生不同程度的影响,总大肠菌群培养时间在16h、18h、20h、32h的检测结果和24h的检测结果之间差异明显,具有统计学意义(P<0.05),其他两两之间无明显差异。大肠埃希氏菌培养时间在16h至22h、32h之间的检测数值和培养24h、28h的检测结果差异明显,具有统计学意义(P<0.05),其他两两之间无明显差异。
3.结论
研究表明,总大肠菌群、大肠埃希氏菌在水中的数量和人体肠道致病菌有一定的关联,所以对于水体污染程度的判定和卫生检测会以水中总大肠菌群、大肠埃希菌数量为检测依据,通过运用酶底物法进行检测,严格按照检测标准和检测条件进行操作,操作简便,检测准确度高,国际上广泛认可,但是受到不同温度、检测时间、环境等影响,对于检测结果也会产生不同程度的影响,通过此次分析可知,酶底物法检测水中总大肠菌群、大肠埃希氏菌的影响因素包括检测温度和检测时间两个方面,和实验室检测环境是否无菌等关联度不大,所以在开展检测时为保证检测的准确度,应当严格控制好培养温度和培养时间,从而提高检测结果的效度和信度,为生活饮用水的日常卫生监督管理提供科学依据。
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