浅析酶底物法检测菌落总数整体解决方案_酶底物法检测仪器,程控定量封口机,大肠菌群检测,酶底物试剂,97/51孔定量检测盘生产厂家-西安立科环保有限公司

浅析酶底物法检测菌落总数整体解决方案

添加时间：2023-12-12

　　菌落总数作为水厂每日必检的一个项目，通常与水体受到有机物污染的程度成正相关，其结果可以作为评判水质清洁程度和考核净化效果的指标。

传统的平皿计数法在检测过程中面临着多种挑战，比如：对于环境和人员操作要求非常严格，前期准备时间长，需要配置培养基，测试结果因菌落较小或出现菌落蔓延导致结果计数偏差且不易观察等。

在2023年10月1日正式实施的GB/T 5750.12-2023中针对水中菌落总数检测新增加了酶底物法检测方法。该方法相较于传统的平皿计数法中存在的痛点，酶底物法在检测结果准确性、使用便捷性以及环境和人员操作要求等方面，都有很大幅度改善。

酶底物法检测试剂使用基于复合酶底物计数的培养基，培养基中含有多种酶底物，能够被微生物生长过程中产生的酶水解。

在36℃±1℃条件下培养48 h后可释放荧光物质4-甲基伞形酮（4-MU），其在366 nm紫外灯照射下可发出蓝色荧光，配合84孔定量盘使用，对呈现蓝色荧光的培养盘孔槽，进行计数并对比MPN表，即可确定原始水样中可能的菌落总数。

酶底物法检测菌落总数方法与传统平皿法检测方法对比

环节	方法对比
环节	平皿计数法	酶底物法
前期准备	需要提前配置培养基，进行灭菌	无需培养基准备，随取随用，方便快捷
操作过程	加样、注皿、冷却等，操作繁琐、时间长	直接加样、倒盘，操作时间不少于1分钟，简便快捷，可有效节省人工成本和缩短操作时间
检测范围	30~300cfu/ml	无需稀释可检1-738MPN/ml,范围更大
测试结果	1、需要耗费较多精力进行菌落肉眼计数 2、容易出现操作不当，造成菌落蔓延，导致结果无法有效计数	1、孔槽数量固定，直接计数荧光孔，查阅MPN表，即可确定水样中可能菌落总数 2、检测结果准确、稳定 3、可以避免菌落蔓延干扰，准确计数
人员、环境要求	对于人员操作要求非常严格（需要专业的无菌操作技术）	降低人员操作的要求，方便、简单、快捷

由此我们可以看出，酶底物法检测相较于传统的平皿法优势多多：

1、操作便捷
无需准备琼脂平板，手工操作少于1min操作简单，降低了操作过程中的污染风险。

2、检测范围广
检测范围为：1~738MPN/mL，比平板计数法范围大，克服平板计数时部分菌落生长过快，计数不准确的缺点。

3、快速读取结果
48h显示结果，72h内观察结果仍然有效，减少人员加班。

在国标中菌落总数“平皿计数法”的检测方法自1985年一直沿用至今，由于成本低而被广大实验室所接受，但是已经不能满足现代的实验室检测要求。而酶底物法则完全弥补了平皿计数法的不足，该方法稳定、检测结果准确可靠，且操作简便、快捷，更加适于普及推广。

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